期刊简介

               《中华保健医学杂志》是由中央军委后勤保障部卫生局(原总后勤部卫生部)主管,中央军委后勤保障部卫生局保健办(原总后勤部卫生部保健局)主办,解放军总医院承办,由中华保健医学杂志编辑部编辑、出版的综合医学学术期刊。1999年3月创刊,2007年6月纳入国家科技统计源期刊(中国科技核心期刊)。                

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  • 杂志名称:中华保健医学杂志
  • 主管单位:解放军保健医学杂志
  • 主办单位:中国人民解放军总后勤部卫生部
  • 国际刊号:11-5698/R
  • 国内刊号:11-5698/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库期刊收录:统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 上海图书馆馆藏
中华保健医学杂志2009年第05期

具有抑制肿瘤前景基因-人MCPIP基因的克隆及细胞定位

关键词:MCPIP, 基因克隆, 细胞定位
摘要:目的 构建人MCPIP基因的真核表达载体,观察其在人胚肾细胞系(HEK293T)细胞中的表达及其定位特征.方法 佛波酯(PMA)刺激单核细胞THP-1转化为巨噬细胞,提取细胞mRNA,反转录为cDNA作为模板,扩增MCPIP基因编码区序列,克隆入真核细胞载体中,酶切鉴定目的 基因.将重组质粒转染HEK293T细胞,Western blot检测MCPIP蛋白质表达状况,激光共聚焦显微镜下直接观察基因定位情况.结果 酶切鉴定和测序证明,成功构建MCPIP真核表达载体.Western blot检测表明MCPIP真核表达载体转染293T细胞表达大小约为70kD的蛋白质.激光共聚焦显微镜下直接观察RFP-MCPIP表达可见在293T细胞中主要为细胞质中点状分布.结论 本研究成功构建了MCPIP真核表达载体,检测到MCPIP在巨噬细胞中高表达.并成功证实其细胞质点状定位的特征.